Bevis for vævsstrukturer, antistoffer og patogener gennem immunmærkning er populær, moderne og nøjagtig. Immunfluorescens henviser til immunmærkning med forberedte fluorescerende antistoffer, der er gjort til at glød under UV-lys.
Ved Direkte immunofluorescensdetektion underlaget undersøges direkte med lysende antistoffer uden primære antistoffer eller kunstige antigener.
Hvad er direkte immunofluorescensdetektion?
Direkte immunofluorescensdetektion er en diagnostisk metode baseret på viden om immunologi, immunfarvning og immunohistokemi. Fokus her er på antistoffers evne til at binde til specifikke punkter i væv eller til antigener i et serum. Disse steder er epitoper.
Ved biokemisk diagnostik er der kunstige antistoffer eller mimetika (ental: mimetisk), der gør det muligt at markere disse antistof-antigenbindinger ved fluorescens eller radioaktivitet. Kunstige antistofkonjugater binder på den ene side til epitoperne og på den anden side har en fluorescerende markør i tilfælde af immunofluorescens. Dette er et alternativ til at bruge radioaktive markører. Den specielle ting ved direkte detektion af immunofluorescens sammenlignet med indirekte påvisning er, at antistoffet, der binder til antigenets epitop i det undersøgte materiale, også repræsenterer antistofkonjugatet med den fluorescerende markør. Yderligere antistoffer er ikke nødvendige for direkte detektion.
Fluorescein, der skinner under UV-lys, og fluoresceinisothiocyanat (FITC) bruges som farvestoffer til fremstilling af det kunstige antistof konjugater i immunofluorescens. Indtil videre læser det en smule kompliceret, men direkte påvisning af immunofluorescens er standard diagnostisk metode til medicinsk laboratorium til en lang række medicinske spørgsmål. Antistofferne med det fluorescerende farvestof er klar til salg.
Funktion, effekt & mål
Direkte detektion af immunfluorescens er tilgængelig til vævsundersøgelser med henblik på farvning af visse strukturer i væv. Men de er også tilgængelige for enkeltceller. Flowcytometri spiller en stor rolle her. Endelig er der faststof- og flydende faseimmunassays. Immunofluorescensundersøgelser af væv er især vigtige inden for onkologi, dvs. den medicinske behandling af kræftsygdomme.
Tumorspecifikke antigener i tumorvæv kan påvises direkte med immunofluorescens. Disse undersøgelser af vævsprøver fra tumorer er ofte vigtige for at finde ud af, hvor de eksisterende metastaser kom fra kroppen, eller for at afgøre, om en tumor er godartet eller ondartet. Undersøgelsen af individuelle celler med direkte immunofluorescensdetektion anvendes til at finde virusantigener, bakterielle antigener og andre epitoper.
For eksempel kan du finde ud af, om cellerne er inficeret af en virus, og hvilket trin i infektionscyklussen cellerne er i. Navnet FACS (= fluorescensaktiveret cellesortering) er en yderst effektiv flowcytometri-metode, hvor celler markeret med fluorescens fordeles til forskellige prøverør afhængigt af farvetype. Denne procedure er vigtig inden for immunologi, hæmatologi og infektionssygdomme.
Immunofluorescensimmunanalyser muliggør direkte påvisning af miljøgifter, genetisk modificerede organismer og visse tilsætningsstoffer i fødevarer. I denne eksperimentelle opsætning er der altid en fast og en flydende fase. Talrige patogener, inklusive HIV-virus, der forårsager AIDS, kunne også påvises direkte. Når detektering af infektiøse og autoimmune sygdomme er det dog ofte et spørgsmål om at detektere antistoffer snarere end antigener. Dette er de forsvarsmolekyler, der dannes af kroppens immunsystem. I henhold til den her præsenterede definition er sådanne bevis ikke direkte bevis, da de fluorescerende antistoffer ikke kobles direkte til kroppens egne antigener, men til antigenerne i testarrangementet.
Disse antigener i den eksperimentelle opsætning er igen knyttet til kroppens egne antistoffer. Direkte immunfluorescensdetektion for almindelige infektioner, for eksempel HIV-vira og klamydia, bruges kun i specielle detekterings- og bekræftelsestest. Der er test for mange flere sygdomme. I de fleste situationer er indirekte påvisning af antistoffer mere egnet til infektionssygdomme, da kroppens eget immunsystem har en genial evne til at huske tidligere infektioner. I andre situationer komplementerer direkte påvisning af antigener og indirekte påvisning af antistoffer hinanden. Sidstnævnte viser, at der tidligere har fundet en infektion sted, mens førstnævnte giver mere præcise oplysninger om den aktuelle status for patogenens aktivitet.
Du kan finde din medicin her
➔ Lægemidler til at styrke forsvaret og immunforsvaretRisici, bivirkninger og farer
Ved direkte påvisning af immunofluorescens, som med al medicinsk dokumentation, er der to risici: risikoen for et forkert, positivt resultat og risikoen for et forkert, negativt resultat. Falske, positive resultater medfører psykologisk ubehag og stor stress for patienten.
Derfor føjes yderligere testprocedurer til positive resultater, især hvis diagnosen fører til drastiske livsændringer. Risikoen for et falskt negativt resultat er, at patienten ikke lærer om truslen mod sit eget helbred og måske endda for folkesundheden i god tid. Derfor er det godt at lave en masse research og foretage og tilbyde et stort antal forskellige immunfluorescens direkte detektioner klar til salg. Sammen med andre direkte og indirekte detektionsmetoder for sygdomme og patologier øger dette diagnosens nøjagtighed.
Direkte påvisning er baseret på antistofkonjugatet, der på den ene side binder til antigenernes epitoper og på den anden side også forårsager fluorescens. Et sådant produkt bruges derfor kun i en type testprocedure og bruges ikke til andre typer testprocedurer.Dette er en vigtig proceduremæssig forskel til det indirekte bevis, hvor de fluorescerende antistoffer er forudgående med primære antistoffer til epitopbinding. Antistofkonjugatet er derfor egnet til forskellige tests. Denne proceduremæssige forskel er forskellig fra den medicinske forskel mellem den indirekte påvisning af antistoffer og den direkte påvisning af antigener.
